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“松果菊维C”胶囊中松果菊的鉴别试验方法


松果菊是从国外引进的草本植物,原产于美国、加拿大。“松果菊维C”胶囊中主要成分为松果菊全草提取物的浓缩物,含有多羟基酚类有效成分和菊糖,其保健作用是提高免疫力。本文探讨了该保健品中有效成分的薄层色谱鉴别方法。在有效成分尚不明确的情况下,薄层色谱是鉴别产品真伪的有效方法。
1. 材料与方法
1.1 试剂 硅胶G(青岛海洋化工厂);羧甲基纤维素钠(CMC-Na)水溶液(0.5%,配制后需静置2周以上,取上清液或经200r/min离心后的上清液),XAD-4树脂(美国Sigma化学公司),正丁醇,乙醇,乙醚,冰乙酸(均为分析纯),松果菊植物(厂家提供)。
1.2 仪器 蒸发皿,层析柱(1.5×20cm),薄层涂布器(0.3mm),玻璃板(5×20cm),展开槽(内长25cm、宽6cm、高4cm),紫外光灯(365nm),10μL微量注射器。
1.3 实验步骤
1.3.1 提取
试样 称取0.5g研磨均匀的试样,置于50mL具塞锥形瓶中,加入20mL70%乙醇溶液,振摇提取30min后,用滤纸滤入蒸发皿中于水浴上挥发溶剂至约1mL。
松果菊植物对照品 称取0.5g松果菊植物粉末,加入20mL70%乙醇,回流提取约1h,过滤于蒸发皿中,置水浴上挥发溶剂至约1ml。
1.3.2 柱净化 将试样对对照品提取物各加20mL水稀释后通过XAD-4柱净化,装入的XAD-4柱高3cm,试样溶液通过柱后用30mL水洗柱,再用30mL70%乙醇洗脱,将洗脱液置水浴上浓缩至干,加入1ml,70%乙醇溶解残渣,吸出移入一具塞试管中供薄层色谱测定用。
1.3.3 薄层色谱分析
硅胶G薄层板的制备 称取4g硅胶G,加入10mL CMC-Na溶液研磨至粘稠状后铺成0.3mm厚的薄层板3块。室温干燥后置105℃活化1h,置干燥器中备用。
点样 在距薄层板底部2.5cm的基线上点3个点;对照品2μL、样液2μL。
展开 在展开槽内倒入10mL展开剂正丁醇-冰乙酸-乙醚-水(5+5+0.1+1),饱和15~30min后展薄层板至10cm,取出通风挥干溶剂。
观察 将薄层板置365nm紫外光灯下观察,试样应与松果菊对照品在相同位置上显相同颜色的荧光。
2 结果与讨论
松果菊的薄层色谱图 所测定的试样“松果菊维C”胶囊中均检出松果菊,试样与松果菊对照品在相同位置上显出相同的四个蓝白、蓝紫相间的荧光点,见色谱图中1,2,3点。
水溶性杂质的影响 因松果菊含有菊糖和一些水溶性杂质影响测定,如不净化直接将试样提取液点于薄层板上则如色谱图中4,6点所示,虽也点样液2μl,但对照品仅分出2个大荧光点,试样分不出荧光点。柱净化是不可缺少的分析步骤

1、样液2μL 4、对照品(未净化)2μL 7、对照品(柱净化)10μL
2、样液加对照品各2μL 5、试样(柱净化)2μL 8、对照品(柱净化)20μL
3、对照品2μL 6、试样(未净化)2μL 9、试样(柱净化)20μL
●——蓝紫色荧光 ○——蓝白色荧光
2.3 点样量的影响 如果将点样量增加至10~20μL,则如色谱图中点7,8所示,对照品分不出4个荧光点,试样点只能分出1个荧光点和1条长荧光带,虽然试样都是经过XAD-4柱净化的,原点上杂质量多仍影响分离效果。
2.4 空气湿度的影响 控制的办法是在展开槽盖内侧贴上水饱和的滤纸条,展开槽内溶剂需饱和15~30min。
2.5 本实验中使用的XAD-4树脂经多次再生后使用,效果仍然很好。